實驗室常用是什么規格的層析柱
層析柱是凝膠層析技術中的主體,我們研究所用的就是同興玻璃儀器,一般用玻璃管或有機玻璃管。根據樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數不同,從而分離的一種層析法。
層析柱是凝膠層析技術中的主體,一般用玻璃管或有機玻璃管。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時應將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外, 直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。
玻璃層析柱,開口大,加料快,不需要其他儀器的配合,上方可以做成標準口與其他的標口玻璃儀器相接,但有不容易測量,篩網下方容易殘留很多液體,層析速度較慢,不準確的特點,一般用于對精度要求沒有那么高的實驗,
加壓層析柱,兩端一般使用4F材料,耐腐蝕,酸堿性的耐度也可以,中段有玻璃材料的,也有有機玻璃材料的,需要與蠕動泵相結合,加快層析速度,用泵將料打進,如果沒有泵則使用比較麻煩。
層析柱進氣泡怎么辦?
空氣進入,如緩沖液走空,連接進入系統過程中
用純水反向沖洗,如果有柱位閥可直接切換流向,沒有的話可將柱子反接
對于大多數層析柱來說可用乙醇沖洗,以提高排氣效率
緩沖液中有氣泡
上柱前將緩沖液脫氣
在緩沖液入口使用空氣感應器
溫度影響,如在冷室操作后馬上在室溫操作,或低溫緩沖液直接在室溫使用
緩沖液在使用前達到熱平衡
層析柱上柱子后壓力大怎么辦
先試試空白運行,就是不經過柱子光走系統,看看壓力是多少,檢查是否系統壓力過大。
如果系統壓力正常,則檢查溶液是否澄清,有無沉淀或泛白。
如果溶液沒有問題,檢查柱頭是否堵塞,柱頭前的濾膜是否需要清洗。
然后檢查下填料是否完整,有無被壓碎的填料或者有無雜志吸附在填料上,參照說明書清洗再生下填料。
層析柱壓力過大容易壓碎填料,需要及時暫停減小壓力后繼續上柱。