凝膠是一類多孔性高分子聚合物,每個顆粒猶如一個篩子。當樣品溶液通過凝膠柱時,相對分子質量較大的物質由于直徑大于凝膠網孔而只能沿著凝膠顆粒間的空隙,隨著溶劑流動,因此流程較短,向前移動速度快而首先流出層析柱;反之,相對分子質量較小的物質由于直徑小于凝膠網孔,可自由地進出凝膠顆粒的網孔,在向下移動過程中,它們從凝膠內擴散到膠??紫逗笤龠M入另一凝膠顆粒,如此不斷地進入與逸出,使流量增長,移動速率慢而后流出層析柱。而中等大小的分子,它們也能在凝膠顆粒內外分布,部分進入顆粒,從而在大分子物質與小分子物質之間被洗脫。這樣,經過層析柱,使混合物中的各物質按其分s子大小不同而被分離。
層析柱上柱子后壓力大怎么辦
先試試空白運行,就是不經過柱子光走系統,看看壓力是多少,檢查是否系統壓力過大。
如果系統壓力正常,則檢查溶液是否澄清,有無沉淀或泛白。
如果溶液沒有問題,檢查柱頭是否堵塞,柱頭前的濾膜是否需要清洗。
然后檢查下填料是否完整,有無被壓碎的填料或者有無雜志吸附在填料上,參照說明書清洗再生下填料。
層析柱壓力過大容易壓碎填料,需要及時暫停減小壓力后繼續上柱。
樹脂裝填使用后的停運儲存
樹脂裝填正常使用后,如因系統檢修或季節性停產等原因停用,需要對樹脂進行充分再生處理與水洗后,再進行密封保存(為防止樹脂長時間儲存而染菌,很多情況下會將樹脂保存于10%的NaCl鹽水中或10%的NaCl + 2%的NaOH堿鹽水中)。
注水保存防失水
對于短時間儲存在樹脂柱內的樹脂,應對樹脂進行充分再生處理與水洗后,向柱內注入一定量的清潔去離子水對樹脂進行保存,須保持一定的液面層高度(液面層穩定高于樹脂床層2cm以上)。