平衡柱子
即用洗脫劑中極性小的溶劑(例如、、等)用計量泵(或氮氣)打入(壓入)層析柱上端。此溶劑因極性小于硅膠,不會把吸附在硅膠上端面的物料中有用物質洗脫下來,而只能將物料中的極性很小的油脂等雜質洗下。另外,此過程還可以將柱中硅膠中的大量空氣往下趕出柱外。這個過程俗稱“平衡”柱子或“平衡”吸附劑??墒构枘z被溶劑浸潤,且排出空氣,有利于續后的洗脫分離過程。
當平衡用的溶劑從柱下流出后,可以停止此過程,改用洗脫劑洗脫分離過程;平衡過程也可以再理行一段時間,將柱子中的空氣多排出一些,但溶劑耗量也會增加。
樹脂裝填使用后的停運儲存
樹脂裝填正常使用后,如因系統檢修或季節性停產等原因停用,需要對樹脂進行充分再生處理與水洗后,再進行密封保存(為防止樹脂長時間儲存而染菌,很多情況下會將樹脂保存于10%的NaCl鹽水中或10%的NaCl + 2%的NaOH堿鹽水中)。
注水保存防失水
對于短時間儲存在樹脂柱內的樹脂,應對樹脂進行充分再生處理與水洗后,向柱內注入一定量的清潔去離子水對樹脂進行保存,須保持一定的液面層高度(液面層穩定高于樹脂床層2cm以上)。
層析柱進氣泡怎么辦?
空氣進入,如緩沖液走空,連接進入系統過程中
用純水反向沖洗,如果有柱位閥可直接切換流向,沒有的話可將柱子反接
對于大多數層析柱來說可用乙醇沖洗,以提高排氣效率
緩沖液中有氣泡
上柱前將緩沖液脫氣
在緩沖液入口使用空氣感應器
溫度影響,如在冷室操作后馬上在室溫操作,或低溫緩沖液直接在室溫使用
緩沖液在使用前達到熱平衡