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凝膠是一類多孔性高分子聚合物，每個顆粒猶如一個篩子。當樣品溶液通過凝膠柱時，相對分子質量較大的物質由于直徑大于凝膠網孔而只能沿著凝膠顆粒間的空隙，隨著溶劑流動，因此流程較短，向前移動速度快而首先流出層析柱；反之，相對分子質量較小的物質由于直徑小于凝膠網孔，可自由地進出凝膠顆粒的網孔，在向下移動過程中，它們從凝膠內擴散到膠?？紫逗笤龠M入另一凝膠顆粒，如此不斷地進入與逸出，使流量增長，移動速率慢而后流出層析柱。而中等大小的分子，它們也能在凝膠顆粒內外分布，部分進入顆粒，從而在大分子物質與小分子物質之間被洗脫。這樣，經過層析柱，使混合物中的各物質按其分s子大小不同而被分離。

硅膠柱層析和大孔樹脂柱層析的區別？

大孔吸附樹脂是一類不含交換基團且有大孔結構的高分子吸附樹脂,具有良好的大孔網狀結構和較大的比表面積,可以通過物理吸附從水溶液中有選擇地吸附有機物即非極性或極性較弱的物質,具有物理化學穩定性高、比表面積大、吸附容量大、選擇性好、吸附速度快、解吸條件溫和、再生處理方便、使用周期長、宜于構成閉路循環、節省費用等諸多優點.樹脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附質) 之間的范德華引力,通過它巨大的比表面進行物理吸附而工作,使有機化合物根據有吸附力及其分子量大小可以經一定溶劑洗脫分開而達到分離、純化、除雜、濃縮等不同目的.

硅膠柱的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而得到分離,一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附,極性較弱的物質不易被硅膠吸附,整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程.其中有微孔,對不同化合物的吸附能力不同,然后選用適當的洗脫劑進行洗脫從而達到分離.

在大孔吸附樹脂的應用過程中,也需要注意一些問題:

①儲存與運輸的過程中,要防止樹脂脫水或受凍而被破壞;

②使用前應按照一定的步驟進行預處理,以去除樹脂內可能含有的分散劑、致孔劑、惰性溶劑等化學殘留;

③在樹脂裝柱運行后,可能有堵塞發生,造成的原因主要有懸浮物污堵、生物

堵塞、鐵及鎂污染和硫酸鈣沉淀,應采用相應的處理措施將堵塞物去除;

④脫附工藝中會產生堿性脫附液,需要進一步處理。

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