上樣
1、干法上樣
①、制樣:將物料用極性較大的且洗脫劑中需用的溶劑溶解成漿狀(或溶液狀),再加入硅藻土(或硅膠)充分混合,晾干;再粉碎成粉未狀,混合均勻。
②、將制好的樣品,置于預柱中或層析柱上端硅膠床層的上面,鋪平;再放上濾布(網),篩板,再按圖裝好柱上端封頭。
2、 濕法上樣
①、制樣:將物料用極性比硅膠小的溶劑(例如:、乙醇-混合液、、等)溶解或制成漿狀,直接倒在層析柱硅膠床層的上面,鋪平即可(如果上樣液多,也可以用泵(或氮氣)慢慢打(壓)入柱中)。
②、同上,放上濾布(網)篩板,裝好上封頭。
層析柱上柱子后壓力大怎么辦
先試試空白運行,就是不經過柱子光走系統,看看壓力是多少,檢查是否系統壓力過大。
如果系統壓力正常,則檢查溶液是否澄清,有無沉淀或泛白。
如果溶液沒有問題,檢查柱頭是否堵塞,柱頭前的濾膜是否需要清洗。
然后檢查下填料是否完整,有無被壓碎的填料或者有無雜志吸附在填料上,參照說明書清洗再生下填料。
層析柱壓力過大容易壓碎填料,需要及時暫停減小壓力后繼續上柱。
樹脂的選擇和處理
在化學分析中應用多的為強酸性陽離子交換樹脂和強堿性陰離子交換樹脂。使用時應當先過篩以除去太大和太小的顆拉,也可以用水泡脹后用篩在水中選取大小一定的顆粒備用。
一般商品樹脂含有一定雜質,使用前必須進行凈化處理。強堿性和強酸性陰陽離子交換樹脂,通常用4mol/LHCl溶液浸泡1-2天,以溶解各種雜質,然后用蒸餾水洗滌至中性。如果需要鈉型陽離子交換樹脂,則用NaCl處理氫型陽離子交換樹脂。