供應信息
層析柱的操作方法
以中壓柱層析法提取分離冬凌草甲素為例：
1.吸附劑的處理及柱子裝填
將一定量薄層層析硅膠裝入搪瓷盤置于烘箱中，于105。C活化2H后，取出放置室溫即可裝柱。柱子采用干法填充，填滿整個柱體，不留死體積，密封后用柱塞式計量溶劑泵按一(5：95)比例泵入溶劑，至溶劑流出止。
2.上樣
將冬凌草的乙醇提取物400G用適量溶解，泵入中壓柱柱頭，然后泵入1000RID。
3.洗脫
以一定比例的一為洗脫液，60ML/MIN的流速進行梯度洗脫，柱的使用壓力為2～ 3KG/C 。按每份500ML收集，TLC檢識展開劑一(2：8)，顯色劑5%香草醛乙醇液
至洗脫完全，相同流份合并，回收溶劑。將冬凌草甲素流份合并蒸干。加入適量熱溶后自然放置，析出結晶，為冬凌草甲素。
4.層析柱再生、平衡
有效成分經TLC檢識全部流出后，用純5000ML再生，一(5：95)平衡后，可再次上樣，反復使用(使用次數隨原料不同而異，一般可連續使用2—6個月以上)。
5.重結晶
冬凌草甲素結晶析出完全后，減壓過濾，然后用少量洗滌(洗滌液保留，作下次熱溶冬凌草甲素用)。將冬凌草甲素再用適量熱溶后放置，結晶再次析出，待結晶完全后，抽濾，用少量洗滌，將結晶室溫下晾干后置真空干燥箱中，35度真空干燥至恒重。密封于瓶中，置干燥器中保存。
6.薄層層析分析
取適量冬凌草甲素對照品及由上述方法得到的冬凌草甲素樣品溶解后點于同一硅膠G薄層板上，以一(8：2)為展開劑進行展開，5% 香草醛乙醇液顯色，于105。C烘至斑點清晰。表明在該展開系統下，冬凌草甲素樣品和對照品都具有相同的RF值，并呈現出同樣的藍綠點，在制備的冬凌草甲素樣品中，沒有雜質斑痕。
層析柱的操作方法
以中壓柱層析法提取分離冬凌草甲素為例：
1.吸附劑的處理及柱子裝填
將一定量薄層層析硅膠裝入搪瓷盤置于烘箱中，于105。C活化2H后，取出放置室溫即可裝柱。柱子采用干法填充，填滿整個柱體，不留死體積，密封后用柱塞式計量溶劑泵按一(5：95)比例泵入溶劑，至溶劑流出止。
2.上樣
將冬凌草的乙醇提取物400G用適量溶解，泵入中壓柱柱頭，然后泵入1000RID。
3.洗脫
以一定比例的一為洗脫液，60ML/MIN的流速進行梯度洗脫，柱的使用壓力為2～ 3KG/C 。按每份500ML收集，TLC檢識展開劑一(2：8)，顯色劑5%香草醛乙醇液
至洗脫完全，相同流份合并，回收溶劑。將冬凌草甲素流份合并蒸干。加入適量熱溶后自然放置，析出結晶，為冬凌草甲素。
4.層析柱再生、平衡
有效成分經TLC檢識全部流出后，用純5000ML再生，一(5：95)平衡后，可再次上樣，反復使用(使用次數隨原料不同而異，一般可連續使用2—6個月以上)。
5.重結晶
冬凌草甲素結晶析出完全后，減壓過濾，然后用少量洗滌(洗滌液保留，作下次熱溶冬凌草甲素用)。將冬凌草甲素再用適量熱溶后放置，結晶再次析出，待結晶完全后，抽濾，用少量洗滌，將結晶室溫下晾干后置真空干燥箱中，35度真空干燥至恒重。密封于瓶中，置干燥器中保存。
6.薄層層析分析
取適量冬凌草甲素對照品及由上述方法得到的冬凌草甲素樣品溶解后點于同一硅膠G薄層板上，以一(8：2)為展開劑進行展開，5% 香草醛乙醇液顯色，于105。C烘至斑點清晰。表明在該展開系統下，冬凌草甲素樣品和對照品都具有相同的RF值，并呈現出同樣的藍綠點，在制備的冬凌草甲素樣品中，沒有雜質斑痕。
柱頭安裝是否合適及是否嚴密的檢查
1、檢查下柱頭是否按圖紙要求安裝?（要求按圖紙要求安裝）
2、檢查下柱頭內，是否安裝了防止吸附劑（例如硅膠）漏出的濾布（或濾網）。
3、所用濾布（濾網）的材質要求能耐所用溶劑的腐蝕，而且孔徑很小，一般要求使用500目以上孔徑大小的濾布（網）。
4、下柱頭安好，緊固后，從柱上端（開口）加入所用洗脫劑中極性較小的一種溶劑（例如已烷、、等），使溶劑液面比下柱頭上部分離出20-30厘米，仔細觀察下柱頭是否漏溶劑。如果漏，則必須堅固（或重裝），直至不漏為止。
5、檢查確實不漏后，放出柱內溶劑，準備裝吸附劑（例如硅膠等）。
您好，歡迎蒞臨龍鼎世紀，歡迎咨詢...
|
王經理：
|
 觸屏版二維碼 |
